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单细胞采集和组织显微切割仪

技术原理 

 

细胞和组织获取系统(CTAS)——基于毛细管的真空脉冲辅助技术

UnipicK+单细胞采集和组织显微切割仪,在已获专利保护的“细胞和组织获取系统(CTAS)”基础上,采用基于毛细管的真空脉冲辅助技术——以真空脉冲负压为动力,玻璃毛细管为工具,在显微镜直接观察下,根据细胞形态、荧光标记、解剖学特征或特定位置,从贴壁、悬浮和3D立体培养的细胞中快速精确地采集单细胞或细胞克隆,或者从组织切片中显微切割特异性组织区域。
UnipicK+的主要组成部件包括:顶部带有可调节LED环形灯的操作头,真空管路和电缆,带有真空模块的控制箱(配备数字化的操作界面),以及可将设备安装于大多数倒置显微镜上的通用型支架。使用时,在取样器头部安装即用型一次性毛细管单元(DCU),通过操控DCU做垂直运动,为校准和采样提供精确定位;取样器头部的LED环形灯可用于照亮组织样本;真空模块包含电子控制装置和带气动管道的真空泵;真空强度、持续时间以及LED灯强度均可按实际操作需要进行调节。

 



产品应用/特点 

 

UnipicK+应用

·单细胞采集
UnipicK+可从细胞培养皿/板或组织切片中采集单个细胞,目前已在几乎所有类型的贴壁、悬浮以及3D培养的细胞中证明了此种采集方法的可行性,包括一些处理起来十分困难的样品,如原代细胞,或取自新鲜冷冻和蔗糖处理的复合组织(如脑)的单个细胞。
·组织显微切割
UnipicK+适用于从复杂异质性组织(如脑)中采集得到特定区域的组织,即对目标组织区域进行显微切割操作。
·单细胞克隆与测序分析
UnipicK+配备有自动分配系统,与下游单细胞分析及下一代测序操作兼容,可在采集完成后将样本分配到培养板、PCR管、8排管、48孔板中,方便进行后续的单细胞克隆扩增、提取核酸进行PCR、微阵列和测序分析等

 

UnipicK+应用举例

 

UnipicK+适用的研究领域:
神经科学,干细胞生物学和单细胞分析,癌症生物学等领域。

UnipicK+产品特点:
1. 数字化的操作界面,简单易懂,无须复杂的培训即可上手。
2. 在显微镜下对组织切片的目标区域进行有效切割,或从标准细胞培养板、培养皿中生长的任何贴壁培养物中收集和沉积单个细胞,体积小至15 nl。
3. 与各种下游单细胞分析和下一代测序操作兼容,方便提取用于下游组学研究的高质量RNA和蛋白质。
4. 采集过程不涉及辐射、激光、热和化学处理,对细胞活性的影响较小,因此收集后的细胞具有较高的存活能力,可以用于再培养;对细胞内大分子活性和完整性影响也较小,适合下游单细胞测序等分析。
5. 适合于多种倒置显微镜。
6. 性价比高,因真空负压辅助技术成本低,仅占激光辅助的显微切割仪成本的一小部分。


耗材 

一次性毛细管单元(DCU):

·由粗(K)壁或薄(N)壁硼硅酸盐毛细管制成;无菌。
·直径范围10-100μm,使用范围从单细胞采集、培养细胞克隆采集、到特定组织区域的显微切割。
·DCU的内径大致对应于采集区域的大小,采集区域可能会由于所设定的真空持续时间和强度而有所不同。
·每包装6个。

 


 

附件:

通用型支架:
将UnipicK+与几乎任何类型的倒置显微镜连接,从单细胞培养到更先进的系统,使实验工作更具灵活性。

 


通用型载物台适配器:
实现从多种培养装置中采集和分配样本:切片到切片,板到板,切片到板,切片/板到PCR管/8管条/48孔板。



产品规格 

界面

数字化操作

压力泵最大正压

5 PSI(≈258.6mmHg / 34.5 kPa)

真空泵最大负压

10 PSI(≈517.1mmHg / 69.0 kPa)

压力持续时间

0.1 ~ 1.0 s

样本兼容性

贴壁细胞,悬浮细胞,3D培养物,新鲜活组织,新鲜冷冻组织,蔗糖处理组织和固定过的组织等

样本分辨率

培养的单细胞和内径20μm的组织切片

适用组织切片厚度范围

5-300μm

细胞存活率

可达95%(数据来自于对3T3、CHO以及SH-SY5Y细胞系的评估)

一次性毛细管单元(DCU)规格

10 ~ 100 μm

线性马达单次位移距离

1.5 μm

线性马达最大位移距离

23.3 mm

线性马达最大位移速度

0.30 mm/s

样本载体

25mm载玻片;
35mm和50mm培养皿;
96/24/12/6孔培养板;
48孔PCR管;
微流芯片等

分配通量

可达48个样本

采集体积

DCU20μm:10nl- 2.5μl
DCU30μm:35nl- 3.0μl
DCU40μm:70nl- 5.0μl
(由标准DMEM培养基计算得出;实际采集量取决于DCU直径和样本粘度)

采集速度

组织切片 - 可达12个细胞/min
细胞培养物 - 可达25个细胞/min
(预估的采集速度仅作为参考值,实际速度可能与用户/应用相关)

显微镜兼容性

可兼容多种型号的倒置显微镜



参考文献 

    ·Kudo LC, Vi N, Ma Z, Fields T, Avliyakulov NK, Haykinson MJ, Bragin A, Karsten SL. Novel Cell and Tissue Acquisition System (CTAS): microdissection of live and frozen brain tissues.PLoS One. 2012;7(7):e41564. Epub 2012 Jul 24.
    ·Mannello F, Ligi D, Magnani M. Deciphering the single-cell omic: innovative application for translational medicine.(PMID:23256674) Expert Rev Proteomics [2012]
    ·Ma Z, Kudo LC, Karsten SL. KuiqpicK: A Novel Instrument for Rapid Collection of Individual Live Cells from Adherent Cultures. J Biomol Tech. 2014 May; 25(Suppl): S25. PMCID: PMC4162253
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    ·Lelièvre, S.A., Hodges, K.B., Vidi, P.-A. Application of Theranostics to Measure and Treat Cell Heterogeneity in Cancer (Book Chapter) 2014 Cancer Theranostics
    ·Surrette C, Shoudy D, Corwin A, Gao W, Zavodszky MI, Karsten SL, Miller T, Gerdes MJ, Wood N, Nelson JR, Puleo CM. Microfluidic Tissue Mesodissection in Molecular Cancer Diagnostics.J Lab Autom. 2016 Nov 18. pii: 2211068216680208. [Epub ahead of print] PMID: 27864340
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产品彩页


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